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申基
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三項呼吸道病原體(2019-nCoV/甲型流感/乙型流感)核酸檢測試劑(PCR-熒光探針法)


技術(shù)參數(shù)

產(chǎn)品描述

  【摘要】

  本試劑盒用于體外定性檢測人咽拭子樣本中的的新型冠狀病毒(2019-nCoV)、甲型流感病毒和乙型流感病毒,高靈敏度和特異性的核酸檢測可一次檢測多種病毒,全程檢測時間約1小時,可實現(xiàn)對呼吸道感染病的早發(fā)現(xiàn)、早隔離、早報告和早治療,及早為臨床提供準(zhǔn)確的診療和感染防控依據(jù)。

  【檢驗原理】

  三項呼吸道病原體核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)采用TaqMan熒光探針法,針對2019-nCoV、甲型流感病毒和乙型流感病毒的高度保守且特異性區(qū)域,設(shè)計熒光檢測的引物探針,采用不同的熒光基團進(jìn)行標(biāo)記,檢測過程中的核酸經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄為cDNA,在擴增過程中,特異性引物和探針與靶序列結(jié)合,通過Taq酶的DNA聚合酶活性和5’-3’外切酶活性實現(xiàn)PCR產(chǎn)物形成與熒光信號累積完全同步;通過檢測不同熒光基團信號實現(xiàn)對樣本中2019-nCoV、甲型流感病毒和乙型流感病毒核酸的定性檢測。

  試劑盒含有內(nèi)參設(shè)置,作為對試劑、核酸質(zhì)量以及操作本身的質(zhì)控,避免檢測結(jié)果假陰性。

  【檢驗方法】

  1. 試劑準(zhǔn)備

  1.1. 取出試劑盒中反應(yīng)buffer及引物探針Mix,室溫放置,待完全融解后,振蕩混勻,離心備用;取出試劑盒中的檢測酶液,離心后備用。

  1.2. 根據(jù)需準(zhǔn)備樣品數(shù)N(N=樣本數(shù)+1管陽性質(zhì)控品+1管陰性質(zhì)控品)配制PCR-Mix,向熒光定量PCR八聯(lián)反應(yīng)管中分裝每孔20μL PCR-Mix,用畢反應(yīng)buffer、引物探針Mix和檢測酶液立即放入-18℃以下凍存。

  2. 樣本處理

  樣本收到后先采用水浴鍋56℃30min進(jìn)行滅活。

  提取采集的咽拭子樣本,應(yīng)保證RNA滿足實驗需要的RNA數(shù)量,提取的RNA樣品立即檢測或于-70℃以下保存(不超過7天);同時取相應(yīng)體積的陽性質(zhì)控品和陰性質(zhì)控品進(jìn)行提取。

  3. 加樣

  在所設(shè)定好的每個反應(yīng)管中分別依次加入步驟2中提取的陰性質(zhì)控品提取RNA、陽性質(zhì)控品提取RNA、待測樣本RNA,各10µL,蓋緊管蓋,簡短離心。

  4.實時擴增(詳見說明書)

  4.1儀器通道及反應(yīng)體積選擇

  4.2實時擴增條件設(shè)定

  5.結(jié)果分析

技術(shù)參數(shù)

檢測原理 PCR-熒光探針 適用機型 ABI 7500、宏石SLAN-96P
樣本類型 咽拭子 包裝規(guī)格 50 人份/盒
檢測時間 約1小時 有效期 9個月
儲存條件  -18℃以下避光保存    
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